依据RAPD片段克隆而建立的团头鲂PCR鉴定法

依据RAPD片段克隆而建立的团头鲂PCR鉴定法 Development of DNA Markers for Megalobrama Amblycephala Yih with RAPD-Derived PCR Primers 宋平 1 2 3 4 5 first-author 胡珈瑞 1 2 3 4 5 胡隐昌 1 2 3 4 5 周桂伟 1 2 3 4 5 武汉大学生命科学学院 武汉大学生命科学学院 武汉大学中南医院 武汉大学中南医院 中国水产科学研究院珠江水产研究所 中国水产科学研究院珠江水产研究所 中国水产科学研究院长江水产研究所,湖北,武汉,430072 中国水产科学研究院长江水产研究所,湖北,武汉,430072 ,湖北,荆州,434000 ,湖北,荆州,434000 通过对团头鲂 RAPD片段的克隆、Southern杂交筛选和 DNA序列分析 ,设计出 3对 PCR引物 :M1F/ M1R、M3 F/ M3 R和 M5 F/ M5 R.这 3对引物分别扩增出约 1.0 0、1.15、0 .5 6kb的 DNA主带 ;H ae 能将前两个片段酶解成两个几乎相等或相似的小片段 .经部分团头鲂群体和其它 12种鱼 DNA PCR验证 ,除三角鲂外 ,这 3对引物具有很强的团头鲂特异性 ,重复性 10 0 % ,可以用于除三角鲂以外的团头鲂的分子标记或分子鉴定 . We designed three sets of locus-specific PCR primers: M1F/M1R?M3F/M3R and M5F/M5R, through random amplified polymorphic DNA（RAPD） fragment cloning?southern blot selecting and DNA sequencing analysis. By the primer sets, amplification products showed three major DNA bands:1.0 kb（M1F/M1R）?1.15 kb（M3F/M3R） and 0.5 kb（M5F/M5R）. The former two can be digested into two almost same or similar fragments with HaeⅢ. The PCR results of all tested samples （n=30） and other 11 specieses of fish revealed the three sets of PCR primers are very special and highly reproductive （100%） for Megalobrama amblycephala Yih. Although the PCR results between Megalobrama amblycephala Yih. and Megalobrama terminalis （Rich.） are identity, the three PCR primer sets can be used as powerful tools for the identification and nuclear DNA markers of Megalobrama amblycephala Yih. except Megalobrama temindis （Rich.）. 核DNA标记 PCR 团头鲂 单链构象多态性 nuclear DNA marker PCR Megalobrama amblycephala Yih. SSCP Q78 国家自然科学基金 （ 39770 5 91）;第三世界科学院 （意大利 ）研究基金 （ 95 -34 8RG/BIO/AS）;珠江水产研究所农业部重点实验室资助项目 2001-04-01 2021-04-01 4