在大肠杆菌中利用反义RNA抑制乙肝病毒（HBV）X基因的表达

在大肠杆菌中利用反义RNA抑制乙肝病毒（HBV）X基因的表达 INHIBTION OF HBV X GENE EXPRESSION BY ITS ANTISENS RNA IN E coli 杨建琪 1 2 3 first-author 张锡元 1 2 3 李文鑫 1 2 3 张晓刚 1 2 3 王平 1 2 3 武汉大学生命科学学院 武汉大学生命科学学院 School of Life Science,Wuhan University,Wuhan 430072,China)Zhang Xiaogang School of Life Science,Wuhan University,Wuhan 430072,China)Zhang Xiaogang 中国预防医学科学院病毒所基因工程国家重点实验室 中国预防医学科学院病毒所基因工程国家重点实验室 Wang Ping Wang Ping 武汉大学生命科学学院中国预防医学科学院病毒所基因工程国家重点实验室 武汉大学生命科学学院中国预防医学科学院病毒所基因工程国家重点实验室 将乙肝病毒（ＨＢＶ）ａｙｗ株完整的Ｘ基因正向重组到原核表达质粒ｐＢＶ－２２１的ＰＬ启动子下游，得到能表达Ｘ蛋白的重组质粒ｐＢＶ－ＨＢＶ（＋）；同时将Ｘ基因反向重组到原核表达质粒ｐＢＶ－２２０的ＰＬ启动子下游，得到能转录Ｘ基因反义ＲＮＡ的重组质粒ｐＢＶ－ＨＢＸ（－）．利用这两个质粒，构建出能同时转录Ｘ基因ｍＲＮＡ和反义ＲＮＡ的重组质粒ＰＥＸ．ＡＮ－ＨＢＸ，并在原核水平上，证实了反义ＲＮＡ对Ｘ基因的表达具有明显的抑制作用，从而为在真核水平上利用反义ＲＮＡ对Ｘ基因进行调控的研究提供了有利的基础． In both direction,placing the entire HBV X gene DNA sequence under thecontrol of PL promoter of expression plasmids pBV-221and PBV-220. The result showed thatthe recombined plasnlids pBV-HBX（+） and PBV-HBX（-） were constructed suuessfully. InPBV-HBX（+）, HBV X gene was cloflctl in normal ORF （Open Reading Frame） and couldexpress correct X protein. But for pBV-HBX（- ）,the X gene’ S direction was opposite and itcould only transcript the antisense RNA of HBV X gene. With the two plasmids, plasmidPEX. AN-HBX which could transcript HBV X gene mRNA and antisense RNA at same timewas constructed.With the procaryotic expression system transformed with the above plasmids, HBV Xprotein was expressed successfully in E coli DH5α and obvious inhibition to this expressionby antisense RNA was ohservated in E coli DH5α. 反义RNA 抑制 HBV X基因 原核表达质粒 antisense RNA inhibition HBV X gene procaryotic expression plasmid R512.62 1995-04-01 2021-04-01 4