藻红蓝α亚基脱辅基蛋白基因的克隆和表达

藻红蓝α亚基脱辅基蛋白基因的克隆和表达 Cloning and Overexpessing Apo Phycoerythrocyanin α Subnit Gene 盛树斌 SHENG Shu bin 1 first-author 马晓军 MA Xiao jun 1 霍海蓉 HUO Hai rong 1 赵开弘 ZHAO Kai hong 1 武汉大学生命科学学院,武汉,430072 武汉大学生命科学学院,武汉,430072 College of Life Sciences, Wuhan University College of Life Sciences, Wuhan University 用 Ｐ Ｃ Ｒ技术从层理鞭枝藻总 Ｄ Ｎ Ａ 中扩增藻红蓝蛋白 α亚基脱辅基蛋白的基因（ｐｅｃ Ａ）， 将ｐｅｃ Ａ 克隆于ｐ Ｂｌｕｅｓｃｒｉｐｔ，然后将ｐｅｃ Ａ 基因插入表达载体ｐ Ｇ Ｅ Ｍ Ｄ，形成的重组质粒在 Ｂ Ｌ２１（ Ｄ Ｅ３）中获得了高效表达，表达蛋白形成包涵体．高效表达的蛋白质的分子量为１９×１０３ ，与藻红蓝蛋白α亚基脱辅基蛋白的分子量一致，经 Ｄｏｔ Ｅ Ｌ Ｉ Ｓ Ａ 进一步证实该表达蛋白为藻红蓝蛋白α亚基脱辅基蛋白 By PCR method, apo phycoerythrocyanin α subunit gene （pecA） of Mastigoladus laninosus was amplified from its genomic DNA, and then cloned in pBluescript. The pecA gene was subcloned into the expression vector pGEMD, and then transformed into E.coli BL21（DE3）. After induction, a new protein of molecular weight 19×10 3 existing in inclusion body was overexpressed. The expression product was confirmed to be apo phycoerythrocyanin α subunit by Dot ELISA. 藻红蓝蛋白 基因克隆 基因表达 phycoerythrocyanin gene clone gene overexpression Q943.2 国家自然科学基金,武汉市晨光计划资助项目 1999-04-01 2021-04-01 4