羟基含量对Ru（bpy） 3 2+ /CDs@H 2 O 2 体系检测多巴胺的影响 Effect of Hydroxyl Content on Dopamine Detection by Ru（bpy） 3 2+ /CDs@H 2 O 2 System 1 first-author 马 纳，女，硕士生，现从事纳米生物分析。E-mail： mana199802@163.com 马 纳，女，硕士生，现从事纳米生物分析。E-mail： mana199802@163.com mana199802@163.com 1 1 1 2 1 2 corresp E-mail： sbbice@126.com E-mail： sbbice@126.com sbbice@126.com 湖北民族大学 生物资源保护与利用湖北省重点实验室，湖北 恩施 445000 湖北民族大学 生物资源保护与利用湖北省重点实验室，湖北 恩施 445000 Hubei Key Laboratory of Biologic Resources Protection and Utilization， Hubei Minzu University， Enshi 445000， Hubei， China Hubei Key Laboratory of Biologic Resources Protection and Utilization， Hubei Minzu University， Enshi 445000， Hubei， China 湖北民族大学 化学与环境工程学院，湖北 恩施 445000 湖北民族大学 化学与环境工程学院，湖北 恩施 445000 School of Chemistry and Environmental Engineering， Hubei Minzu University， Enshi 445000， Hubei， China School of Chemistry and Environmental Engineering， Hubei Minzu University， Enshi 445000， Hubei， China 以2B铅笔芯为原料，用电氧化法在水相中制备荧光碳点（CDs），再通过H 2 O 2 氧化得到CDs@H 2 O 2 ，利用透射电子显微镜（TEM）、荧光光谱、Fourier变换红外光谱（FT-IR）与X射线光电子能谱（XPS）对CDs和CDs@H 2 O 2 进行表征。结果表明，相对于CDs，CDs@H 2 O 2 表面具有更丰富的羟基官能团。将CDs与CDs@H 2 O 2 分别用作Ru（bpy） 3 2+ 阳极电化学发光（ECL）的共反应剂，Ru（bpy） 3 2+ /CDs@H 2 O 2 体系的ECL信号强度是Ru（bpy） 3 2+ /CDs体系的8.2倍，证实羟基是CDs作Ru（bpy） 3 2+ 共反应剂的活性官能团。基于多巴胺（DA）对Ru（bpy） 3 2+ /CDs@H 2 O 2 体系ECL信号的猝灭作用，构建了关于DA的ECL猝灭传感器，检测的线性范围为1.6~56.0 μmol/L，检出限为0.23 μmol/L（ S/N =3），且实现了对人血清中DA浓度的检测。 Using 2B pencil lead as raw material, fluorescent carbon dots (CDs) was prepared in aqueous phase by electric oxidation method, and then CDs@H 2 O 2 was obtained by H 2 O 2 oxidation. CDs and CDs@H 2 O 2 were characterized by electron transmission electron microscopy (TEM), fluorescence spectroscopy, Fourier transform infrared spectroscopy (FT-IR) and X-ray photoelectron spectroscopy (XPS). The results show that the surface of CDs@H 2 O 2 has more hydroxyl functional groups than CDs. CDs and CDs@H 2 O 2 were respectively used as co-reactant of Ru(bpy) 3 2+ anode electrochemiluminescence (ECL). The ECL signal of Ru(bpy) 3 2+ /CDs@H 2 O 2 system was 8.2 times that of Ru(bpy) 3 2+ /CDs system. It was confirmed that hydroxyl group was the active functional group of CDs as Ru(bpy) 3 2+ coreactive agent. Based on the quenching effect of dopamine (DA) on ECL signal in Ru(bpy) 3 2+ /CDs@H 2 O 2 system, the ECL quenching sensor for DA was constructed. The linear range of detection was 1.6-56.0 μmol/L, and the detection limit was 0.23 μmol/L ( S/N =3). The detection of DA concentration in human serum was realized. 碳点 多巴胺 电致化学发光 共反应剂 联吡啶钌 血清 carbon dot dopamine electrochemiluminescence coreactant Ru(bpy) 3 2+ serum 0　 引 言 1 作为一类新兴的零维碳纳米材料，荧光碳点（carbon dots，CDs）具有尺寸小、化学稳定性高、水溶性好、毒性低的特点，且易于功能化，被广泛用于活细胞成像、生物标记等生物医学领域 [ 1 1 ， 2 2 ] 。电化学发光（electrochemiluminescence, ECL）结合了电化学和化学发光的优点，具有较高的灵敏度、选择性和重现性。其中，联吡啶钌（Ru(bpy) 3 2+ ）/三丙胺（tripropylamine, TPrA）共反应体系具有良好的稳定性，已经被广泛地研究 [ 3 3 ， 4 4 ] 。然而，TPrA具有毒性且易挥发，在浓度较高时才能获得稳定的ECL信号，因此需要研发高效、低毒的共反应试剂，以满足Ru(bpy) 3 2+ 为发光体的ECL体系在生物分析领域中的应用 [ 5 5 ， 6 6 ] 。Long等 [ 7 7 ] 首次报道了CDs作Ru(bpy) 3 2+ 阳极ECL体系的共反应剂，发现CDs中的苄基单元为活性位点。CDs能够成为Ru(bpy) 3 2+ ECL体系的良好共反应剂，归因于CDs良好的溶解性、稳定性和快速的电子转移能力、适合的氧化还原势等特点 [ 8 8 ] 。Qi等 [ 9 9 ] 发现，与CDs具有类似结构和性能的石墨烯量子点（graphene quantum dots, GQDs）也可以用作Ru(bpy) 3 2+ 的共反应剂。他们通过NaBH 4 将GQDs上的羰基还原为羟基，得到还原性GQDs（R-GQDs），在用作Ru(bpy) 3 2+ 共反应剂时表现出更高的活性，羟基是GQDs作共反应试剂的活性官能团，并以此设计了一种氯代苯酚的ECL猝灭传感器。为进一步提高Ru(bpy) 3 2+ /CDs体系的ECL信号强度，Carrara等 [ 10 10 ] 通过将含丰富氨基的CDs与Ru(bpy) 3 2+ 通过酰胺键键合，缩短了共反应剂CDs与发光体Ru(bpy) 3 2+ 之间的距离，从而形成自增强ECL体系，以达到提高Ru(bpy) 3 2+ /CDs的ECL信号强度的目的。Liu等 [ 11 11 ] 基于三（4,4-二羧基联吡啶）氯化钌（Ru(dcbpy) 3 2+ ）与CDs之间的氢键作用，也得到了自增强的ECL体系。为进一步促进Ru(bpy) 3 2+ /CDs ECL体系在生物和环境检测方面的应用，提高其发光强度和发光效率，仍需大量的基础研究工作。 多巴胺（dopamine，DA）是生物体内重要的神经传递物质，是中枢神经系统中重要的儿茶酚胺类物质 [ 12 12 ] ，人体内DA含量失常会引发神经肌肉失调、阿尔茨海默病、精神分裂症等疾病 [ 13 13 ， 14 14 ] ，建立简单、快速的DA分析方法对于疾病的预防、诊断及治疗具有重要意义。本文采用电氧化法与化学氧化法制备了羟基含量较低的CDs与羟基含量较高的CDs@H 2 O 2 ，研究CDs表面的羟基含量对CDs作Ru(bpy) 3 2+ 共反应剂活性的影响。并在此基础上，构建了一种关于DA的ECL猝灭传感器。 1　 实验部分 1 1.1　主要试剂与仪器 2 试剂：铅笔芯（2B）购自中国第一铅笔有限公司；联吡啶钌（Ru(bpy) 3 2+ ）购自苏州纳凯科技有限公司；TPrA购自上海九鼎化学科技有限公司；DA、H 2 O 2 （30%）等试剂均购自上海阿拉丁生化科技股份有限公司；实验用水均为超纯水。 仪器：TU-1901型双光束紫外-可见光光度计（UV-Vis，北京普析通用仪器有限责任公司）；Avatar 360 型 Fourier 变换红外光谱仪（FT-IR，Thermo Nicolet公司）；RF-6000型荧光分光光度计（Shimadzu公司）；Escalab 250Xi型X射线光电子能谱（XPS，赛默飞世尔科技公司）；MPI-E Ⅱ型全光谱电化学发光检测仪（西安瑞迈分析仪器有限公司）等仪器设备。 1.2　CDs与CDs@H 2 O 2 的制备 2 以2B铅笔芯为工作电极，铂丝电极为对电极，50 mL 0.2 mol/L pH 7.2的磷酸盐缓冲溶液（PBS）为电解液，采用两电极体系制备CDs，施加电势为6 V，电氧化6 h后，收集反应液。以1 000 r/min转速离心30 min，将所得上清液置于透析袋（分子截留量1 000）中透析5 d，浓缩至5 mL，得到棕黄色液体，产率为3.3%，记为CDs。 取上述CDs 2 mL与0.2 mL 30% H 2 O 2 于10 mL圆底烧瓶中，在水浴锅中50 ℃搅拌反应30 min，所得溶液在透析袋（分子截留量1 000）中透析3 d，浓缩至2 mL后得到淡黄色溶液，产率为3.1%，记为CDs@H 2 O 2 。 1.3　电化学检测 2 循环伏安（CV）扫描及ECL实验均在电化学发光检测仪上进行，采用粒径为0.3 mm和0.05 mm的Al 2 O 3 粉末依次对玻碳电极（GCE，直径3.0 mm）进行抛光，再用超纯水和乙醇交替超声清洗，N 2 吹干。将电极倒置，以GCE为工作电极、饱和甘汞电极为参比电极，铂丝为对电极构成三电极体系，在扫描速率为50 mV/s、电势扫描范围为+0.2~+1.5 V、光电倍增管高压为900 V，以0.2 mol/L pH 7.2 PBS（分别含有Ru(bpy) 3 2+ 、Ru(bpy) 3 2+ /CDs或Ru(bpy) 3 2+ /CDs@H 2 O 2 ）为电解液，记录电化学信号与电化学发光信号。 2　 结果与讨论 1 2.1　材料表征 2 2.1.1　TEM分析 3 利用透射电子显微镜（TEM）测试CDs与CDs@H 2 O 2 的粒径，其结果如 图1 图1 所示。由 图1 图1 可知，制备得到的CDs与CDs@H 2 O 2 都具有较好的分散性，粒径较均一。统计结果表明，CDs与CDs@H 2 O 2 的平均粒径分别为2.4±0.2 nm与2.5±0.5 nm，表明文中所制备的两种碳质纳米颗粒的粒径接近，CDs被H 2 O 2 氧化后，粒径变化不大。 2.1.2　FT-IR分析 3 对CDs与CDs@H 2 O 2 的结构进行表征，结果如 图2 图2 所示。由 图2 图2 可知，与CDs相比较，CDs@H 2 O 2 位于3 440 cm -1 处羟基（—OH）伸缩振动峰更明显，1 610、1 060 cm -1 处吸收峰分别归属为CDs与CDs@H 2 O 2 表面羰基（C=O）伸缩振动及醚键（C—O—C）伸缩振动，CDs@H 2 O 2 在1 720 cm -1 与1 160 cm -1 处具有更加明显的有羧基（C=O）伸缩振动与（C—O）伸缩振动。由此可知，与CDs相比，CDs@H 2 O 2 表面具有更加丰富的含氧官能团，这归因于在CDs@H 2 O 2 的制备过程中采用H 2 O 2 作为氧化剂 [ 15 15 ] 。 2.1.3　XPS分析 3 对CDs与CDs@H 2 O 2 的组成和结构进行分析，其结果如 图3 图3 所示。由 图3 图3 (a)可知，CDs与CDs@H 2 O 2 均主要由C和O两种元素组成，其中位于284.2 eV和534.5 eV的特征峰分别归属为C 1s与O 1s。通过对C 1s和O 1s的峰面积进行积分，采用相对灵敏度因子法得到各目标元素的百分含量 [ 16 16 ] ，计算得出CDs与CDs@H 2 O 2 的O/C原子比分别为0.31与0.71。CDs与CDs@H 2 O 2 的高分辨率C 1s峰可以分解成3个峰（ 图3 图3 (b)(c)），分别对应于sp 2 碳（C=C）和sp 3 碳（C—C）（284.8 eV）、醇碳（C—O）（286.2 eV）及羰基碳（C=O）（288.0 eV）。对CDs与CDs@H 2 O 2 不同含氧官能团的相对含量进行统计，结果见 表1 表1 。与CDs相比较，CDs@H 2 O 2 中C—O含量增加了7.28%，C=O含量接近。由此可以得出，与CDs相比较，CDs@H 2 O 2 表面具有更丰富的含氧官能团，其中C—O的含量明显增加。 样品 C—C/C=C C—O C=O CDs 72.29 15.41 12.30 CDs@H 2 O 2 64.87 22.69 12.44 % 2.1.4　荧光分析 3 在300~420 nm范围内，以20 nm幅度改变激发波长，分别测试CDs与CDs@H 2 O 2 的水溶液在350~700 nm范围内的荧光变化。如 图4 图4 所示，CDs与CDs@H 2 O 2 的荧光发射波长均随激发波长的改变而改变，荧光强度表现出激发光依赖性。CDs与CDs@H 2 O 2 最佳发射波长均位于452 nm。当激发波长为420 nm时，CDs的发射波长为524 nm，CDs@H 2 O 2 的发射波长为505 nm。由此可知，与CDs相比较，CDs@H 2 O 2 在长波长区域发射波长降低。这是由于随着CDs@H 2 O 2 表面羟基增加，荧光发射波长发生了蓝移 [ 17 17 ， 18 18 ] 。 2.2　电化学分析 2 图5 图5 为Ru(bpy) 3 2+ 、Ru(bpy) 3 2+ /CDs及Ru(bpy) 3 2+ /CDs@H 2 O 2 体系的电化学行为。由 图5 图5 (a)可知，在相同实验条件下，GCE在含2.0 μmol/L Ru(bpy) 3 2+ 的0.2 mol/L PBS（pH 7.2）中，于1.08 V处出现可逆的氧化还原峰；加入30 ng/mL CDs后，Ru(bpy) 3 2+ /CDs在1.08 V处的还原峰减弱，氧化峰电流增加，说明CDs在Ru(bpy) 3 2+ 的电化学氧化还原过程中起到了催化作用 [ 7 7 ] ；在2.0 μmol/L Ru(bpy) 3 2+ 中加入30 ng/mL CDs@H 2 O 2 后，Ru(bpy) 3 2+ 的还原峰几乎消失，氧化峰电流值进一步增加，展现出更好的催化活性。 （a） CV曲线；（b） ECL曲线；（c） ECL增强效果；（d） Ru（bpy） 3 2+ /CDs@H 2 O 2 体系ECL的稳定性 (a) CV curves; (b) ECL curves; (c) the enhanced effect of ECL signal; (d) the ECL stability of Ru(bpy) 3 2+ /CDs@H 2 O 2 进一步考察了Ru(bpy) 3 2+ 、Ru(bpy) 3 2+ /CDs与Ru(bpy) 3 2+ /CDs@H 2 O 2 体系的ECL信号。由 图5 图5 (b)可知，Ru(bpy) 3 2+ 在1.08 V处开始产生ECL信号，在1.18 V处达到最大值，产生的ECL信号较弱；加入CDs后，Ru(bpy) 3 2+ /CDs体系在1.05 V处开始出现ECL信号，在1.18 V处达到最大值，ECL信号强度最大值为71；加入CDs@H 2 O 2 后，Ru(bpy) 3 2+ /CDs@H 2 O 2 体系在1.00 V处开始出现ECL信号，在1.18 V处达到最大值，最大值为582，是Ru(bpy) 3 2+ /CDs体系的8.2倍。这说明，CDs作Ru(bpy) 3 2+ 共反应剂时，CDs表面的羟基官能团为活性官能团 [ 19 19 ] 。 为比较CDs@H 2 O 2 与TPrA对Ru(bpy) 3 2+ 的ECL增强效果，向含2.0 μmol/L Ru(bpy) 3 2+ 的PBS溶液中各加入30 ng/mL（约0.03 μmol/L）CDs @H 2 O 2 与2.0 μmol/L TPrA，分别测试Ru(bpy) 3 2+ /CDs@H 2 O 2 与Ru(bpy) 3 2+ /TPrA的ECL信号。由 图5 图5 (c)可知，在具有相同ECL信号强度时，TPrA浓度是CDs@H 2 O 2 浓度的66.7倍。 为考察Ru(bpy) 3 2+ /CDs@H 2 O 2 体系的稳定性，在电势0.2~1.5 V范围内，GCE在含2.0 μmol/L Ru(bpy) 3 2+ 与30 ng/mL CDs@H 2 O 2 的PBS中连续扫描20圈，Ru(bpy) 3 2+ /CDs@H 2 O 2 体系ECL信号的相对标准偏差（RSD）为1.66%，见 图5 图5 (d)。 此外，还考察了Ru(bpy) 3 2+ /CDs@H 2 O 2 体系长期储存的稳定性，在储存7 d后，ECL信号强度仍保持为初始值的97.4%，这表明所制备的Ru(bpy) 3 2+ /CDs@H 2 O 2 体系具有良好的稳定性。将3批次的CDs@H 2 O分别用于Ru(bpy) 3 2+ /CDs@H 2 O 2 ECL体系的构建，在相同条件下，ECL信号值的相对标准偏差（RSD）为2.2%。上述结果表明，Ru(bpy) 3 2+ /CDs@H 2 O 2 体系具有良好的稳定性与重现性，这为其在分析检测中的应用奠定了良好的基础。 2.3　工作曲线 2 考察了DA对Ru(bpy) 3 2+ /CDs@H 2 O 2 体系ECL信号的猝灭作用，向含2.0 μmol/L Ru(bpy) 3 2+ 与30 ng/mL CDs@H 2 O 2 的0.2 mol/L pH 7.2的PBS溶液中，加入不同浓度（1.0、1.6、3.8、4.8、7.0、17.0、56.0 μmol/L）的DA，结果如 图6 图6 所示。由 图6 图6 (a)可知，随着DA浓度的增加，体系Ru(bpy) 3 2+ /CDs@H 2 O 2 的ECL信号强度逐渐降低，DA对Ru(bpy) 3 2+ /CDs@H 2 O 2 的ECL信号猝灭程度逐渐增大。根据 图6 图6 (b)，该猝灭过程符合Stern-Volmer方程 [ 20 20 ] ，在1.6~56.0 μmol/L范围内，DA浓度与Ru(bpy) 3 2+ /CDs@H 2 O 2 ECL的猝灭程度呈良好线性关系，猝灭常数 K SV =2.2×10 5 (mol/L) -1 ，线性回归方程为 I 0 / I = 0.22 c + 0.01（ I 0 为体系起始ECL信号强度， I 为加入一定浓度猝灭剂后体系的ECL信号强度， c (mol/L)为DA浓度），线性相关系数 R =0.998，检出限为0.23 μmol/L（ S/N =3）。与其他CDs用于检测DA的方法相比较（ 表2 表2 ），本文中采用CDs@H 2 O 2 作Ru(bpy) 3 2+ 共反应剂，对DA的检出限与文献[ 21 21 ]相当，优于文献[ 22 22 ~ 25 25 22~25 ]的检出限。 （a） ECL信号；（b） 线性关系曲线 (a) ECL signals; (b) linear relation curve 注： β -CD-MWCNTs/Plu-AuNPs为 β -环糊精修饰多壁碳纳米管和聚鲁米诺杂化金纳颗粒复合材料；CQDs/CuO为碳量子点和氧化铜纳米复合材料；B-CDs为硼掺杂CDs；Pdots为聚合物点 CDs 线性范围/（μmol/L） 检出限/（μmol/L） β -CD-MWCNTs/Plu-AuNPs [ 21 21 ] 1~56 0.19 CQDs/CuO [ 22 22 ] 1~180 25.4 B-CDs [ 23 23 ] 280~2 500 6 CDs [ 24 24 ] 33~98 4 Pdots [ 25 25 ] 10~400 4 Ru(bpy) 3 2+ /CDs@H 2 O 2 1.6~56.0 0.23 2.4　实际样品分析 2 将Ru(bpy) 3 2+ /CDs@H 2 O 2 体系用于人血清样品中DA含量的检测，以检验ECL猝灭传感器的实用性。将人血清样品分散于0.2 mol/L pH 7.2的PBS中，采用加样回收法测定样品中多巴胺的浓度，检测结果如 表3 表3 所示。Ru(bpy) 3 2+ /CDs@H 2 O 2 体系的ECL猝灭传感器用于实际样品中DA检测的回收率为98.6%~103.4%，RSD均小于5%。检测结果令人满意，表明此传感器可以用于实际样品中DA含量的检测。 检测量/(μmol/L) 加入量/(μmol/L) 回收量/(μmol/L) 回收率/% RSD/% 1.25 1.0 2.22 99.8 2.3 1.72 3.8 5.71 103.4 4.1 7.14 17.0 23.79 98.6 3.4 3　 结 语 1 本文以铅笔芯为原料制备CDs与CDs@H 2 O 2 ，研究了羟基含量对CDs作Ru(bpy) 3 2+ 共反应剂活性的影响。实验结果表明，与CDs相比较，羟基含量高的CDs@H 2 O 2 作Ru(bpy) 3 2+ 共反应试剂对ECL信号具有更好的增敏作用。基于DA对该体系ECL信号的猝灭作用，构建了关于DA的ECL猝灭传感器，检测方法的线性范围为1.6~56.0 μmol/L，检出限为0.23 μmol/L（ S/N =3）。将Ru(bpy) 3 2+ /CDs@H 2 O 2 体系用于人血清中DA的检测，回收率为98.6%~103.4%。 本文为提高CDs作Ru(bpy) 3 2+ 共反应剂的活性提供了一种思路，可望促进Ru(bpy) 3 2+ /CDs在生物和环境分析领域的应用。 参考文献 BAKER S N ， BAKER G A . Luminescent carbon nanodots： Emergent nanolights ［J］. Angewandte Chemie （International Ed in English） ， 2010 ， 49 （ 38 ）： 6726 - 6744 . DOI： 10.1002/anie.200906623 http://dx.doi.org/10.1002/anie.200906623 . Luminescent carbon nanodots： Emergent nanolights FAN J Y ， CHU P K . Group Ⅳ nanoparticles： Synthesis， properties， and biological applications ［J］. Small ， 2010 ， 6 （ 19 ）： 2080 - 2098 . DOI： 10.1002/smll.201000543 http://dx.doi.org/10.1002/smll.201000543 . Group Ⅳ nanoparticles： Synthesis， properties， and biological applications DENNANY L ， FORSTER R J ， RUSLING J F . Simultaneous direct electrochemiluminescence and catalytic voltammetry detection of DNA in ultrathin films ［J］. Journal of the American Chemical Society ， 2003 ， 125 （ 17 ）： 5213 - 5218 . DOI： 10.1021/ja0296529 http://dx.doi.org/10.1021/ja0296529 . Simultaneous direct electrochemiluminescence and catalytic voltammetry detection of DNA in ultrathin films WILSON R ， JOHANSSON M K . Photoluminescence and electrochemiluminescence of a Ru（Ⅱ）（bpy） 3 -quencher dual-labeled oligonucleotide probe ［J］. Chemical Communications （Cambridge， England） ， 2003 （ 21 ）： 2710 - 2711 . DOI： 10.1039/b307550h http://dx.doi.org/10.1039/b307550h . Photoluminescence and electrochemiluminescence of a Ru（Ⅱ）（bpy）3-quencher dual-labeled oligonucleotide probe RICHTER M M . Electrochemiluminescence （ECL） ［J］. Chemical Reviews ， 2004 ， 104 （ 6 ）： 3003 - 3036 . DOI： 10.1021/cr020373d http://dx.doi.org/10.1021/cr020373d . Electrochemiluminescence （ECL） HAN S ， NIU W X ， LI H J ， et al . Effect of hydroxyl and amino groups on electrochemiluminescence activity of tertiary amines at low tris（2，2'-bipyridyl）ruthenium（Ⅱ） concentrations ［J］. Talanta ， 2010 ， 81 （ 1/2 ）： 44 - 47 . DOI： 10.1016/j.talanta.2009.11.037 http://dx.doi.org/10.1016/j.talanta.2009.11.037 . Effect of hydroxyl and amino groups on electrochemiluminescence activity of tertiary amines at low tris（2，2'-bipyridyl）ruthenium（Ⅱ） concentrations LONG Y M ， BAO L ， ZHAO J Y ， et al . Revealing carbon nanodots as coreactants of the anodic electrochemiluminescence of Ru （bpy）₃ ²⁺ ［J］. Analytical Chemistry ， 2014 ， 86 （ 15 ）： 7224 - 7228 . DOI： 10.1021/ac502405p http://dx.doi.org/10.1021/ac502405p . Revealing carbon nanodots as coreactants of the anodic electrochemiluminescence of Ru （bpy）₃ ²⁺ WANG H Y ， ABDUSSALAM A ， XU G B . The role of doping strategy in nanoparticle-based electrochemiluminescence biosensing ［J］. Bioelectrochemistry ， 2022 ， 148 ： 108249 . DOI： 10.1016/j.bioelechem.2022.108249 http://dx.doi.org/10.1016/j.bioelechem.2022.108249 . The role of doping strategy in nanoparticle-based electrochemiluminescence biosensing QI B P ， ZHANG X R ， SHANG B B ， et al . A facile method to sensitively monitor chlorinated phenols based on Ru（bpy） 3 2+ electrochemiluminescent system using graphene quantum dots as coreactants ［J］. Carbon ， 2017 ， 121 ： 72 - 78 . DOI： 10.1016/j.carbon.2017.05.045 http://dx.doi.org/10.1016/j.carbon.2017.05.045 . A facile method to sensitively monitor chlorinated phenols based on Ru（bpy）32+ electrochemiluminescent system using graphene quantum dots as coreactants CARRARA S ， ARCUDI F ， PRATO M ， et al . Amine-rich nitrogen-doped carbon nanodots as a platform for self-enhancing electrochemiluminescence ［J］. Angewandte Chemie ， 2017 ， 129 （ 17 ）： 4835 - 4839 . DOI： 10.1002/ange.201611879 http://dx.doi.org/10.1002/ange.201611879 . Amine-rich nitrogen-doped carbon nanodots as a platform for self-enhancing electrochemiluminescence LIU X H ， LI L B ， LUO L J ， et al . Induced self-enhanced electrochemiluminescence aptamer sensor for 17 β -estradiol detection based on nitrogen-doped carbon quantum dots as Ru（dcbpy） 3 2+ coreactant： What role of intermolecular hydrogen bonds play in the system ［J］. Journal of Colloid and Interface Science ， 2021 ， 586 ： 103 - 109 . DOI： 10.1016/j.jcis.2020.10.074 http://dx.doi.org/10.1016/j.jcis.2020.10.074 . Induced self-enhanced electrochemiluminescence aptamer sensor for 17β-estradiol detection based on nitrogen-doped carbon quantum dots as Ru（dcbpy）32+ coreactant： What role of intermolecular hydrogen bonds play in the system SENEL M ， DERVISEVIC E ， ALHASSEN S ， et al . Microfluidic electrochemical sensor for cerebrospinal fluid and blood dopamine detection in a mouse model of Parkinson’s disease ［J］. Analytical Chemistry ， 2020 ， 92 （ 18 ）： 12347 - 12355 . DOI： 10.1021/acs.analchem.0c02032 http://dx.doi.org/10.1021/acs.analchem.0c02032 . Microfluidic electrochemical sensor for cerebrospinal fluid and blood dopamine detection in a mouse model of Parkinson’s disease TAKMAKOV P ， ZACHEK M K ， KEITHLEY R B ， et al . Carbon microelectrodes with a renewable surface ［J］. Analytical Chemistry ， 2010 ， 82 （ 5 ）： 2020 - 2028 . DOI： 10.1021/ac902753x http://dx.doi.org/10.1021/ac902753x . Carbon microelectrodes with a renewable surface DE JONGHE B ， BASTUJI-GARIN S ， SHARSHAR T ， et al . Does ICU-acquired paresis lengthen weaning from mechanical ventilation ［J］. Intensive Care Medicine ， 2004 ， 30 （ 6 ）： 1117 - 1121 . DOI： 10.1007/s00134-004-2174-z http://dx.doi.org/10.1007/s00134-004-2174-z . Does ICU-acquired paresis lengthen weaning from mechanical ventilation ASADZADEH-KHANEGHAH S ， HABIBI-YANGJEH A ， NAKATA K . Decoration of carbon dots over hydrogen peroxide treated graphitic carbon nitride： Exceptional photocatalytic performance in removal of different contaminants under visible light ［J］. Journal of Photochemistry and Photobiology A： Chemistry ， 2019 ， 374 ： 161 - 172 . DOI： 10.1016/j.jphotochem.2019.02.002 http://dx.doi.org/10.1016/j.jphotochem.2019.02.002 . Decoration of carbon dots over hydrogen peroxide treated graphitic carbon nitride： Exceptional photocatalytic performance in removal of different contaminants under visible light BAO L ， ZHANG Z L ， TIAN Z Q ， et al . Electrochemical tuning of luminescent carbon nanodots： From preparation to luminescence mechanism ［J］. Advanced Materials ， 2011 ， 23 （ 48 ）： 5801 - 5806 . DOI： 10.1002/adma.201102866 http://dx.doi.org/10.1002/adma.201102866 . Electrochemical tuning of luminescent carbon nanodots： From preparation to luminescence mechanism MA Y S ， ZHANG X M ， BAI J L ， et al . Facile， controllable tune of blue shift or red shift of the fluorescence emission of solid-state carbon dots ［J］. Chemical Engineering Journal ， 2019 ， 374 ： 787 - 792 . DOI： 10.1016/j.cej.2019.06.016 http://dx.doi.org/10.1016/j.cej.2019.06.016 . Facile， controllable tune of blue shift or red shift of the fluorescence emission of solid-state carbon dots SARKAR S ， KANCHIBOTLA B ， NELSON J D ， et al . Giant increase in the metal-enhanced fluorescence of organic molecules in nanoporous alumina templates and large molecule-specific red/blue-shift of the fluorescence peak ［J］. Nano Letters ， 2014 ， 14 （ 10 ）： 5973 - 5978 . DOI： 10.1021/nl502990h http://dx.doi.org/10.1021/nl502990h . Giant increase in the metal-enhanced fluorescence of organic molecules in nanoporous alumina templates and large molecule-specific red/blue-shift of the fluorescence peak WANG Y ， LU J ， TANG L H ， et al . Graphene oxide amplified electrogenerated chemiluminescence of quantum dots and its selective sensing for glutathione from thiol-containing compounds ［J］. Analytical Chemistry ， 2009 ， 81 （ 23 ）： 9710 - 9715 . DOI： 10.1021/ac901935a http://dx.doi.org/10.1021/ac901935a . Graphene oxide amplified electrogenerated chemiluminescence of quantum dots and its selective sensing for glutathione from thiol-containing compounds SIEGEL R ， GLAZIER S . TNT sensor： Stern-volmer analysis of luminescence quenching of ruthenium bipyridine ［J］. Journal of Chemical Education ， 2021 ， 98 （ 8 ）： 2643 - 2648 . DOI： 10.1021/acs.jchemed.0c01221 http://dx.doi.org/10.1021/acs.jchemed.0c01221 . TNT sensor： Stern-volmer analysis of luminescence quenching of ruthenium bipyridine JIA D ， DAI J Y ， YUAN H Y ， et al . Selective detection of dopamine in the presence of uric acid using a gold nanoparticles-poly（luminol） hybrid film and multi-walled carbon nanotubes with incorporated β -cyclodextrin modified glassy carbon electrode ［J］. Talanta ， 2011 ， 85 （ 5 ）： 2344 - 2351 . DOI： 10.1016/j.talanta.2011.07.067 http://dx.doi.org/10.1016/j.talanta.2011.07.067 . Selective detection of dopamine in the presence of uric acid using a gold nanoparticles-poly（luminol） hybrid film and multi-walled carbon nanotubes with incorporated β-cyclodextrin modified glassy carbon electrode ELUGOKE S E ， FAYEMI O E ， ADEKUNLE A S ， et al . Electrochemical sensor for the detection of dopamine using carbon quantum dots/copper oxide nanocomposite modified electrode ［J］. FlatChem ， 2022 ， 33 ： 100372 . DOI： 10.1016/j.flatc.2022.100372 http://dx.doi.org/10.1016/j.flatc.2022.100372 . Electrochemical sensor for the detection of dopamine using carbon quantum dots/copper oxide nanocomposite modified electrode ANJU ， RAIS A ， RAWAT K ， et al . Boron-doped carbon quantum dots： A ‘turn-off’ fluorescent probe for dopamine detection ［J］. Nanotechnology ， 2020 ， 32 （ 2 ）： 025501 . DOI： 10.1088/1361-6528/abb84d http://dx.doi.org/10.1088/1361-6528/abb84d . Boron-doped carbon quantum dots： A ‘turn-off’ fluorescent probe for dopamine detection BARUAH U ， GOGOI N ， KONWAR A ， et al . Carbon dot based sensing of dopamine and ascorbic acid ［J］. Journal of Nanoparticles ， 2014 ， 2014 ： 178518 . DOI： 10.1155/2014/178518 http://dx.doi.org/10.1155/2014/178518 . Carbon dot based sensing of dopamine and ascorbic acid HUANG H ， BAI J ， LI J ， et al . Fluorescence detection of dopamine based on the polyphenol oxidase-mimicking enzyme ［J］. Analytical and Bioanalytical Chemistry ， 2020 ， 412 （ 22 ）： 5291 - 5297 . DOI： 10.1007/s00216-020-02742-1 http://dx.doi.org/10.1007/s00216-020-02742-1 . Fluorescence detection of dopamine based on the polyphenol oxidase-mimicking enzyme 10.14188/j.1671-8836.2022.0259 O657.1 A 1671-8836（2023）03-0349-07 马纳，秦莉莉，刘锋净， 等.羟基含量对Ru（bpy） 3 2+ /CDs@H 2 O 2 体系检测多巴胺的影响［J］.武汉大学学报（理学版），2023，69（3）：349-355. DOI： 10.14188/j.1671-8836.2022.0259 http://dx.doi.org/10.14188/j.1671-8836.2022.0259 . 马纳，秦莉莉，刘锋净， 等.羟基含量对Ru（bpy）32+/CDs@H2O2体系检测多巴胺的影响［J］.武汉大学学报（理学版），2023，69（3）：349-355. DOI：10.14188/j.1671-8836.2022.0259. MA Na，QIN Lili，LIU Fengjing， et al .Effect of Hydroxyl Content on Dopamine Detection by Ru（bpy） 3 2+ /CDs@H 2 O 2 System ［J］. J Wuhan Univ （ Nat Sci Ed ），2023，69（3）：349-355. DOI： 10.14188/j.1671-8836.2022.0259（Ch http://dx.doi.org/10.14188/j.1671-8836.2022.0259(Ch ）. MA Na，QIN Lili，LIU Fengjing，et al.Effect of Hydroxyl Content on Dopamine Detection by Ru（bpy）32+/CDs@H2O2 System ［J］.J Wuhan Univ （Nat Sci Ed），2023，69（3）：349-355. DOI：10.14188/j.1671-8836.2022.0259（Ch）. 国家自然科学基金（22264014）；湖北省教育厅科学技术研究项目（B2021157）；生物资源保护与利用湖北省重点实验室开放基金 （PT012106）；湖北民族大学高水平科研成果校内培育项目 （PY22006）；湖北民族大学博士启动基金 （MY2015B019） 2022-11-04 2023-06-24 2023-07-11 39574656 武汉大学学报（理学版） 3 69